位于上环必列者士街37号的“东华三院梅艳芳长者日间护理中心”，是梅艳芳捐款100万港元资助筹建，于1995年3月启用。
1990年，梅艳芳举办30场“百变梅艳芳夏日耀光华演唱会”后宣布不再领取任何音乐方面的奖项（其后所获均为音乐致敬荣誉），发展重心转移至影坛及慈善事业。
1991年宣布退出乐坛并于同年12月至1992年一月举行了30场“梅艳芳告别舞台演唱会”，消息哄动整个华人社会。“告别舞台演唱会”场场爆满，她与歌迷在这次演唱会中都显得难舍难离，场面非常感人。谭耀文在2013年《怀念梅艳芳演唱会》时透露：梅艳芳当时的体能相当惊人，因为每场演唱会都有30分钟不停的唱跳环节。谭耀文、许志安、草蜢都有参与该表演，但当唱跳环节完了到后台吸氧气时，她已经换好衣服，然后回台上继续表演。1992年4月，国际有线电视新闻网(CNN)播映《梅艳芳特辑》，评述她的歌艺与麦当娜及Diana Ross并驾齐驱。
1994年2月12日，梅艳芳被邀到美国全新最大表演场地MGM Grand Garden Arena献唱，在她之前就有美国巨星芭芭拉·史翠珊，之后有珍娜·杰克森。根据《最后的蔓珠莎华 – 梅艳芳的演艺人生》(增订版)，连炎辉先生透露这场演唱会麦当娜亦是座上客。同年，梅艳芳最终敌不过热情的歌迷，于1994年举行“感激歌迷演唱会”复出歌坛，并推出大碟《是这样的》，当中〈情归何处〉和翻唱自梁朝伟的〈朦胧夜雨里〉等歌曲传颂一时。与此同时，她的唱片全球总销量超越一千万张，是首位香港女歌手有此成绩。梅艳芳同年亦于澳门开了三场演唱会，最贵的票价是5万元，至今仍然是一项未有香港歌手破到的纪录。1995年，梅艳芳举行了15场复出个唱。虽然如此，她比以前低调了许多，谢绝了一切不必要的应酬。对于音乐和舞台表演她更加重视品质，继续寻求突破，并将更多精力放在了公益慈善和栽培新人方面，对社会公益作出很大贡献。自90年代中期起，梅艳芳逐渐转战台湾及海外市场，推出了多张高品质国语专辑。1996年，阔别五年的她重新执任新秀歌唱比赛评审，更因此正式认识该届冠军与多年粉丝何韵诗（后来更成为她唯一的女徒弟）。
1998年度十大中文金曲颁奖典礼获得“香港乐坛最高荣誉大奖——金针奖”，成为该奖项最年轻的得奖者，后来于同年黄霑与顾嘉煇合办的《黄霑、顾嘉煇真友情演唱会》中担任其中一名嘉宾并压轴出场。1999年2月15日受邀参加中国中央电视台春节联欢晚会并演唱歌曲〈床前明月光〉。1999-2000年，她跟黄耀明、王双骏、蔡一智等新派音乐人合作，制作出《Larger Than Life》和《I’m So Happy》两张备受乐迷好评的唱片，当中跟陈奕迅合唱的〈同声一哭〉颇受欢迎。
除了香港之外，她在中国大陆、台湾以至亚洲各地都有广泛的乐迷。国语金曲有〈亲密爱人〉、〈放开你的头脑〉、〈女人花〉及〈床前明月光〉等。
1990年代初梅参演的电影《东方三侠》、《审死官》和《逃学威龙3之龙过鸡年》都是卖座之作；1998年她更凭《半生缘》再次夺得第17届香港电影金像奖的最佳女配角。电影《审死官》是梅艳芳的喜剧代表作，她与“无厘头”搞笑之王周星驰搭戏，表演丝毫不显逊色，其中经典对白和拿捏得当的动作神情更成为电影亮点。此外，梅艳芳与周星驰的另一部喜剧片《逃学威龙三之龙过鸡年》以及同成龙的两部喜剧动作片《奇迹》和《醉拳II》均属电影佳作，梅艳芳在其中大展自己的搞笑天分，为电影增色不少。2001年电影《锺无艳》是梅艳芳最后一部喜剧，她在片中破天荒反串男角，将昏庸好色的齐宣王演得活灵活现，并凭此片于2001年获得《明报周刊》演艺动力大奖的最突出女演员奖。
她在乐坛广收徒弟，包括草蜢、许志安、何韵诗、谭耀文和彭敬慈，而苏永康、梁汉文、陈奕迅、李克勤等后辈亦曾受到她的提携，李蕙敏在2001年更获赏识而成为其唱片公司Mui Music的旗下艺人。
梅艳芳敢于为香港演艺界争取权益，2001年当选为香港演艺人协会会长，也是首位女性会长；一年后的“刘嘉玲裸照风波”中，她以“天地不容”为号发起游行和声讨大会，呼吁群众抵制《东周刊》。
2002年是她入行20周年，纪念专辑《With》邀得张国荣、谭咏麟、张学友、刘德华、王菲、郑秀文、陈慧琳、林忆莲、黄耀明、许志安及苏永康11位著名歌手合唱，堪称一时佳话。同年梅艳芳在红磡体育馆举行十场《极梦幻演唱会》，她今次更获得Christian Dior提供价值达五百万元的舞台服装，这些时装均来自法国巴黎最新时装展，更是首度在亚洲登场，由于赞助商认为阿梅是一位蜚声国际具巨星风采的明星，她的成功是一个传奇，故更由Dior在巴黎的掌舵人John Galliano为阿梅精心设计此一系列服饰，在演唱会上阿梅还是史上首位同时穿上两件独一无二Christian Dior Couture服饰演出的歌手。
